جهاز التحريك الحراري: تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي

جهاز الثرموسايكلر هو جهاز يسمح بتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بكفاءة وسرعة، من خلال تغييرات تلقائية ودورية في درجة الحرارة المطلوبة لتكبير سلسلة من الحمض النووي الريبي منقوص الأكسجين (DNA)، من إنزيم مقاوم للحرارة.

تستخدم أجهزة الثرموسايكلر للتكبير النوعي أو لقياس كمية الحمض النووي (DNA) المكبر. نتائج تقنيات تكبير الحمض النووي هذه لها تأثير كبير على مجتمعنا، خاصة في هذه الفترة من الوباء حيث أصبحت واحدة من الاختبارات التشخيصية الرئيسية، وهذا هو السبب في أنه يجب التأكد من أن أجهزة الثرموسايكلر دقيقة ومتسقة، من أجل الحصول على نتائج موثوقة.

ما هو تفاعل البوليميراز المتسلسل أو PCR؟

تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) هو تقنية تسمح بالتكبير الأسي لقطعة من الحمض النووي (DNA) المعني. أي، من عدد قليل من النسخ من تلك القطعة، بعد تفاعل PCR، يتم الحصول على ملايين النسخ التي يمكن اكتشافها بسهولة في المختبر. تم اختراع PCR بواسطة كاري موليس في عام 1986 وحصل على جائزة نوبل في عام 1993.

ما هو PCR في الوقت الحقيقي؟

PCR في الوقت الحقيقي هو نمط من PCR نقطة النهاية، حيث يتم اكتشاف وتقدير تراكم الحمض النووي (DNA) المكبر مع تقدم التفاعل، أي: “في الوقت الحقيقي” يتم تحقيق ذلك من خلال دمج جزيء فلوري يرتبط بالحمض النووي (DNA) المكبر، حيث إن زيادة هذا الفلورية تتناسب مع زيادة كمية جزيئات الحمض النووي (DNA) المكبر في التفاعل.

يمكن تصميم بروتوكولات PCR في الوقت الحقيقي لتوفير نتائج كمية وكذلك لإظهار وجود أو عدم وجود قطعة من الحمض النووي (DNA) أو الحمض النووي الريبي (RNA) أو نتائج كمية من خلال حساب عدد النسخ من الحمض النووي (DNA)، والتي عند مقارنتها بمنحنى قياسي، تحدد كمية الكائنات الدقيقة الموجودة في عينة معينة أو لتحديد عدد الجزيئات في RNA لتحديد التعبير عن ذلك على سبيل المثال.

PCR في الوقت الحقيقي هو تقنية تجمع بين التكبير والاكتشاف في خطوة واحدة من خلال ربط منتج PCR من كل دورة مع إشارة شدة الفلورية. تتكون من جهاز ثرموسايكلر متصل بنظام بصري، والذي يراقب إشارة الفلوروفورات المستخدمة لاكتشاف المنتج المكبر. نظرًا لأن الفلورية لهذه تزداد مع تكبير المنتج، فإن عمليات التكبير والاكتشاف تتجمع في خطوة واحدة.

تتميز هذه التقنية بخصائص مهمة مثل الدقة العالية، ونطاق واسع من الكشف، وسرعة في رؤية المنتج. تشمل أنظمة PCR في الوقت الحقيقي جهاز ثرموسايكلر ووحدة قادرة على اكتشاف الإشارات الفلورية لمراقبة تقدم تفاعل التكبير، بالإضافة إلى برنامج لتحليل البيانات. الفلوروفورات المستخدمة لتتبع تكبير الحمض النووي (DNA) خلال PCR في الوقت الحقيقي قد تكون ذات ألفة للحمض النووي (SYBR Green) أو مجسات قطع محددة من الحمض النووي (Taqman probes).

في Kalstein نحن مُصنّعون ونقدم لك أجهزة حرارية ممتازة بأحدث التقنيات وبأفضل الأسعار. لذا ندعوك لإلقاء نظرة هنا